使用細胞破碎儀在破碎樣品時一般要選擇低溫多次破碎的,比如冰水浴,2S破碎~2s暫停,其這么做的目的是為防止超聲破碎過程中產生的高溫而引起的酶活性,使蛋白結構等發生改變。
細胞破碎儀的原理:主要利用超聲波的原理使細胞破碎,由于超聲波發生時會出現空化作用,將使液體形成局部減壓而引起液體內部發生流動,旋渦形成與消失時,會產生很大的壓力使得細胞破碎。
注意:在使用時不要盲目操作,所有操作要在自己能夠把握的前提下進行,不明白的地方可以咨詢服務人員或查看說明書。
為了避免在溶液中產生泡沫,要將超聲探頭完全置于液面以下,并不接觸的前提下盡可能靠近容器底部。為防止處理液溫度的升高,建議在冰上進行,在選擇試管時使用塑料試管,避免使用玻璃試管。在使用過過程中若出現多聚物降解2和蛋白失活,則說明超聲波過強,需要減小頻率,若出現超聲沉淀的情況,則說明功率太大,需要調整功率大小。
細胞破碎儀利用其超聲作用進行樣品破碎的話,一般是破5秒等3秒,超聲3分鐘即可,想要使效果更好,可重復多次進行,切勿一次性超聲時間過長,導致樣品活性受到影響。
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